使用磁珠,简便地从酶反应液和琼脂糖凝胶中纯化高纯度DNA的试剂盒。

高效率DNA片段抽提试剂盒 MagExtractor™ -PCR & Gel Clean up-

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价格表

Code No. 包装 价格 保存温度 说明书
NPK-601 200次份 RMB1,200 室温 -

用途

●酶反应后从DNA溶液中纯化DNA
●从琼脂糖凝胶(TBE及TAE胶)中纯化DNA

说明

本试剂盒是用于从酶反应后的DNA溶液和电泳后的琼脂糖凝胶中纯化出高纯度DNA片段的试剂盒。
利用磁硅珠能吸附溶液中的DNA的原理,简便低成本地回收DNA。纯化的DNA中不含蛋白质和盐等杂质,可以直接用于PCR产物的测序、限制酶、连接反应等多种用途。
本试剂盒可用于PCR反应后引物(引物二聚体)・dNTPs的去除、碱性磷酸酶处理后的脱蛋白处理、电穿孔前DNA样品的脱盐处理、酶反应后缓冲液置换等多种从样品中抽提纯化DNA片段的用途。电泳后从琼脂糖中纯化DNA时,本产品使用了威力强大的离液盐来代替以往的NaI法,所以室温下能在短时间内融解琼脂糖凝胶。另外,与市售的使用硅胶粒和基质的离心柱不同,本试剂盒可根据样品量来自由调整处理规模,因而既经济又方便。
本试剂盒,可与磁珠分离专用台架一起使用。



 

特征

从各种样品中进行抽提,都能获得良好的回收率

能从酶反应溶液和电泳的琼脂糖凝胶中以平均70%以上得率回收高纯度的DNA
 

可简便地在短时间内完成抽提

利用磁硅珠对DNA的吸附性原理,能简便地在短时间内 (DNA溶液约5分钟,琼脂糖凝胶约15分钟)抽提出60bp50kb的DNA从琼脂糖凝胶中纯化的时候,不需要以往琼脂糖凝胶融解所需的加热或水浴等步骤
 

●安全

无需苯酚/氯仿等有害溶液处理
 

●低成本

每处理1个样品只需要花费很少的成本,性价比非常高

 

实验例

1.从溶液中回收DNA

取以λDNA为模板的PCR(120bp1kb2kb)反应液及φX174/HinfⅠ Marker(0.25μg/μl)100μl,按照试剂盒的操作步骤进行纯化,将产物溶于100μl的灭菌水中回收后,分别对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳及对Marker进行聚丙烯酰胺电泳进行分析

结果显示,用本试剂盒可以高纯度地回收DNA片段,并可除去PCR产物(1kb)中出现的引物二聚体另外,本公司的试剂盒能与其他公司的产品一样,可回收40〜60bp以上长度的DNA片段



2.从琼脂糖凝胶中回收DNA

取PCR产物(120bp1kb2kb)及λ DNA溶液(48.5kb)40μl,分别在TBE琼脂糖凝胶和TAE琼脂糖凝胶中进行电泳,切下含有目的片段的凝胶,用本试剂盒进行纯化,产物溶于40μl灭菌水中,然后通过电泳进行检测结果显示,各PCR产物的回收率约为70〜80%,λ DNA的回收率约为60%左右另外,使用其他公司试剂盒的结果中,可知某些DNA的回收量极低
在电泳图中可以看到,回收前后λDNA的移动程度有变化,这是因为在回收前后DNA溶液的盐浓度不同所导致的结果
另外,其他实验已经证明,回收得到的DNA可以用在测序、限制酶处理、连接反应等各种场合





 
产品内容

吸附液
洗涤液

磁珠


※除试剂盒以外还需要准备以下的试剂。
灭菌水
EtOH

基本反应条件

本试剂盒作为手动试剂盒使用时,根据以下步骤提纯高纯度的DNA。

1) 在DNA溶液中添加含有离液盐的吸附液。DNA包含在琼脂糖凝胶中时,通过添加吸附液就可将琼脂糖凝胶溶解。

2) 添加磁硅珠并进行混合,使样品中的DNA被吸附到硅胶表面。

3) 使用洗涤液洗净磁珠,除去蛋白质、盐、dNTPs、引物等杂质。

4) 使用灭菌水或低盐浓度的缓冲液等从磁珠上溶出DNA,进行回收。

备注

MagExtractorTM  系列的各试剂盒中含有的磁性硅珠,其组分各不相同,不能与其他试剂盒中的磁珠混用。

几点建议

●B/F(固/液)分离
手动使用本试剂盒时,若使用磁珠分离专用台架Magical Trapper会操作更简便。也可用简易台式离心机来代替磁珠分离专用台架以进行B/F分离。

●单链DNA的纯化
本试剂盒不适用于单链DNA的纯化。

●回收的样品
回收的DNA溶液中会含有若干EtOH。若需蒸发EtOH,只需在溶出前将吸附DNA的磁珠在55℃下加热5分钟即可。

●纯化时使用的磁珠量

本试剂盒的磁珠每30μl可以吸附最多约5μg的DNA。使用时,一般每纯化2.5μg DNA就放入30μl磁珠,必要时也可改变用量。


FAQ请点击这里。

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