使用磁硅珠的高效率质粒抽提试剂盒。

高效率Plasmid抽提试剂盒 MagExtractor™ -Plasmid-

  • NEW ITEM

价格表

Code No. 包装 价格 保存温度 说明书
NPK-301 500次份 RMB2,200 4℃ 产品说明书

用途

●质粒DNA抽提


说明

回收的基因组DNA可以直接用于PCR等酶反应中。
本试剂盒与磁珠分离台架一起使用,可以从全血直接分离DNA,所以无需进行白血球的分离步骤,非常方便。
本试剂盒是用来从大肠杆菌中抽提高纯度质粒DNA的试剂盒。抽提的质粒DNA可直接用于测序、各种酶反应及转化反应中。
本试剂盒利用磁硅珠能吸附匀浆溶液中质粒DNA的原理来回收质粒DNA,无需借助苯酚等有害试剂来进行除蛋白操作和乙醇沉淀操作。而且,能将使用高速离心机进行的离心操作次数减到最少 (使用自动核酸抽提装置「MFX® 系列」时,无需离心操作)。
本试剂盒,可与磁珠分离专用台架一起使用。




 

特征

惊人的低成本

作为手动试剂盒,每处理一个样品的成本非常低


简便・短时间

其基本原理是利用磁硅珠对质粒DNA的吸附性,能简便地在短时间内抽提出质粒DNA


●安全

不必使用苯酚/氯仿处理


可制备高纯度的质粒DNA

使用本试剂盒抽提的质粒DNA,几乎不含基因组DNARNA和蛋白质等杂质,可用于各种用途

 

实验例

1. 用限制酶处理抽提后的质粒

 对含pUC18的JM109转化体的过夜培养液1.2ml,使用本试剂盒和其他公司的试剂盒抽提质粒。结果显示,用本试剂盒抽提出的质粒中几乎不含有蛋白质和基因组DNA、RNA,能得到与其他公司的试剂盒同等甚至以上的得率。将得到的质粒的一部分进一步用限制酶进行酶切,结果与其他公司的试剂盒抽提得到的质粒一样可被完全酶解。  
由此可见,通过使用本试剂盒,可从大肠杆菌等细菌中抽提出高纯度的质粒。



2.抽提出的质粒的测序分析

将0.5μg本试剂盒抽提出的pUC18,用ABI PRISM 310 Genetic Analyzer进行测序。测序引物采用M13 Primer P8,试剂盒采用dRhodamine Terminator Cycle Sequencing FS Ready Reaction Kit(PE Applied Biosystems)。 
结果显示,用本试剂盒抽提出的质粒的纯度完全符合自动测序仪的要求。






 

参考文献

1)B. Vogelstein and D. Gillespie, Proc. Natl. Acad. Sci. USA76:615-619(1979)
2)R. Boom et al., J. Clin. Microbiol.28: 495-503(1990)


产品内容

2次悬浊液
溶解液Ⅰ*
溶解液Ⅱ
中和液
吸附液
溶出液
磁珠Ⅰ
磁珠Ⅱ
5×Loading Dye
 
*溶解液Ⅰ中有时会出现析出物。请在室温~40℃下把析出物完全溶解后再进行使用。

※除试剂盒以外还需要准备以下的试剂。
灭菌水
EtOH

注意事项

Code No.MFX-192 的产品是自动核酸抽提装置 MFX-9600系列专用的,不能用于手动抽提法中。


基本反应条件

本试剂盒作为手动试剂盒使用时,根据以下步骤抽提高纯度的质粒DNA。

1) 用与碱SDS法相同的原理把菌体溶解中和。

2) 用离心分离方法溶解质粒DNA并回收上清。

3) 通过添加、混合磁硅珠和含有离液盐的溶解、吸附液来把样品中的质粒DNA吸附到硅胶表面。

4) 使用洗净液将磁珠洗净,除去蛋白质、盐等。

5) 使用灭菌水或者低盐浓度的缓冲液等从磁珠上溶出质粒DNA,进行回收。
备注
MagExtractorTM 系列的各试剂盒中含有的磁性硅珠,其组分各不相同,不能与其他试剂盒中的磁珠混用。

几点建议

●B/F(固/液)分离

手动使用本试剂盒时,若使用磁珠分离专用台架Magical Trapper会操作更简便。也可用简易台式离心机来代替磁珠分离专用台架以进行B/F分离。


●对抽提的质粒DNA进行电泳

使用自动核酸抽提装置「MFX系列」,用限制酶处理级的方法回收到的质粒DNA溶液里会含有若干的乙醇,琼脂糖凝胶电泳时,使用一般的Loading Dye不能使其沉淀到凝胶槽底。推荐使用本试剂盒附带的Loading Dye。


●抽提时使用的样品量
样品量过多会导致得率下降。建议使用适度的样品量。

FAQ请点击这里。

相关产品

●磁珠专用台架

品名 Code No. 包装 价格 保存温度 说明书下载
Magical Trapper MGS-101 1个 RMB 1,000 室温 -

●MagExtractorTM 系列

品名 Code No. 包装 价格 保存温度 说明书下载
MagExtractorTM -Genome- NPK-101 100次份 RMB 800 4℃ 产品说明书
MagExtractorTM –Plant Genome- NPK-501 100次份 RMB 1,600 4℃、室温 产品说明书
MagExtractorTM –RNA- NPK-201F 100次份 RMB 2,600 4℃ 产品说明书
MagExtractorTM –Viral RNA- NPK-401F 100次份 RMB 1,600 4℃ 产品说明书
MagExtractorTM –PCR & Gel Clean up- NPK-601 200次份 RMB 1,200 室温 产品说明书