KOD SYBR® qPCR Mix
实验例1:启动子附近序列的扩增


这是从使用该产品的老师那里得到的实验例。希望对实验有参考作用。


 【样品】基因组DNA



 【基因名】Homo sapiens telomerase RNA (TR) gene, promoter and complete squence


CCCGCCCGAGAGAGTGACTCTCACGAGAGCCGCGAGAGTCAGCTTGGCC
AATCCGTGCGGTCGGCGGCCGCTCCCTTTATAAGCCGACTCGCCCGGCAG
CGCACCGGGTTGCGGAGGGTGGGCCTGGGAGGGGTGGTGGCCATTTTTTG
TCTAACCCTAACTGAGAAGGGCGTAGGCGCCGTGCTTTTGCTCCCCGCGC
GCTGTTTTTCTCGCTGACTT



 【引物】


F: CCCGCCCGAGAGAGTGAC      (18bp, Tm: 68.56℃)


 R: AAGTCAGCGAGAAAAACAGC (20bp, Tm: 61.12℃)
※引自ChIP方法的论文。



 【目的片段长度】216 bp



 【反应条件】




DW	X μL
KOD SYBR qPCR Mix	10 μL
PrimerF	4  pmole
PrimerR	4  pmole
50xROX reference dye	0.4 μL
Template DNA	Y μL
------------------------
20 μL



【PCR循环】


 98℃, 2 min.
  ↓
(98℃, 10 sec. - 60℃, 10 sec. - 68℃, 30 sec.) × 40 cycles


 *Date collection设置在延伸一步。